Spectrométrie de masse

Présentation

Des petites molécules organiques aux protéines, la masse moléculaire intacte est une caractéristique clé de son identité. La spectrométrie de masse offre une précision de mesure sur une large gamme de poids moléculaire avec un minimum d’échantillon, souvent en dessous du picomole. En outre, une différence entre la masse théorique et mesurée peut être indicative des modifications potentielles. A plus haute résolution, la mesure de la masse exacte à quelques ppm près, peut aider à élucider la composition élémentaire d’un composé.

Services proposés :

• Détermination à haute résolution de la masse exacte des protéines et peptides
• Contrôle de l’expression, de la mutation et du marquage d’une protéine
• Analyse de la protéolyse ménagée de protéines
• Analyse de complexes non-covalents

Les techniques suivantes sont disponibles :

• Désorption-ionisation laser assistée par matrice SM (MALDI-TOF SM)
  L’échantillon est mélangé à une matrice et est ensuite déposé sur une plaque et soumis à un faisceau laser, provoquant l’ionisation et la désorption. La technique MALDI permet l’analyse des molécules jusqu’à environ 500kDa et a l’avantage de produire des ions de masse élevée, avec une haute sensibilité et peu de fragmentation.

• Electronébulisation SM (ESI-SM)
  Un flux de liquide, contenant un ou plusieurs analytes, est injecté par un capillaire à pression atmosphérique dans la source d’ions du spectromètre de masse. Une différence de potentiel est maintenue entre l’extrémité du capillaire et une contre-électrode, provoquant la formation de microgouttelettes. Un gaz de séchage élimine l’excès de solvant des microgouttelettes, créant des ions moléculaires multichargés ce qui rend l’analyse des molécules de poids moléculaires supérieur à 100kDa possible. L’ESI-MS est une technique qui, dans la plupart des cas, fournit des ions moléculaires avec peu ou pas de fragmentation, due à la basse énergie pendant l’ionisation.

• Chromatographie Liquide couplée à la Spectrométrie de Masse (CL-SM)
  La chromatographie liquide couplée à la spectrométrie de masse par electronébulisation est une technique reconnue pour l’analyse d’échantillons impures et de mélanges complexes.

Mots clés

Spectrométrie de masse (SM), Chromatographie liquide (CL), analyse de protéines et peptides, haute résolution, MALDI, Electronébulisation (ESI), Temps de Vol (TOF), spectrométrie de masse native, complexes non-covalents, protéolyse ménagée.

Contact

Luca Signor

Effectif dédié

Luca Signor
Izabel Berard

Equipement spécifique

• Spectrométre de masse MALDI-TOF (Autoflex, Bruker Daltonics)

• Spectrométre de masse ESI-TOF (6210 TOF CL/SM, Agilent Technologies) couplée à la chromatographie liquide (CL capillaire et nano)

• CLHP-Chip/SM source de nano-electronébulisation CL/SM pour la meilleure sensibilité sur de faibles quantités d’échantillon

• Spectrométre ESI-Q-TOF (Q-TOF Micro, Waters) couplé à la chromatographie liquide (CL capillaire)

Accessibilité

Membres du PSB, académiques et industriels

Coût

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Localisation

IBS
Luca Signor, Izabel Bérard : pièce 6216
Laboratoires : pièces 6214 / 6223

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