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Institut de Biologie StructuraleGrenoble / France

Contacts relatifs à cet article / NEUMANN Emmanuelle
Contacts relatifs à cet article / Benoit Gallet

Microscope Tecnai 12 (FEI)

Tecnai12 120 kV

Microscope dédié à la coloration négative et au contrôle qualité. Possibilité de faire de la tomographie (température ambiante).
Spécificités :
- Tension : 80-120 kV
- Filament : LaB6

Accessoires :
- Caméras GATAN Orius 1000 et Orius 600
- Plusieurs portes-objets : 1 simple tilt, 1 FISCHIONE 2020 tomography holder, 1 porte-objet rotation

Microscope Tecnai F20 (FEI)

FEI Tecnai TF20 200kV FEG

Microscope dédié à la cryo-microscope électronique (détermination de structure d’objets biologiques) et à la cryo-tomographie électronique.
Spécificités :
- Tension 80-200 kV
- Canon à émission de champ (FEG)
- Windows 7

Accessoires :
- Caméra 4kx 4k Ceta FEI
- Plusieurs portes-objets : 1 simple tilt, 1 FISCHIONE 2020 tomography holder, 1 porte-objet cryo GATAN 626 et 1 porte-objet cryo-tomographie GATAN 914

Microscope Tecnai POLARA (FEI)

FEI Tecnai POLARA 300 kV FEG

Spécificités :
- Tension 100-300 kV
- Canon à émission de champ (FEG)

Accessoires :
- Caméra à détection directe d’électrons K2 Summit GATAN
- GIF : filtre d’énergie GATAN post colonne 2k x 2k
- Plusieurs logiciels : Tomographie FEI (FEI), Xplore3D (FEI), GMS 3.2 (GATAN - collecte automatique)

Depuis Février 2010, l’IBS a un nouveau cryo-microscope électronique à transmission Polara haute résolution. Le microscope a été financé par l’intermédiaire de plusieurs instances : IBISA, le CNRS, l’EMBL et la Région Rhône-Alpes, et son acquisition a été possible seulement parce que l’IBS (UMR 5075), l’UVHCI (UMI 3265) et l’EMBL Grenoble Outstation ont déployé des efforts communs pour l’obtenir. Les microscopistes du partenariat pour la biologie structurale (PSB) ont accès à ce microscope.

Ce microscope est un cryo-microscope électronique à transmission avec un canon à émission de champ de 300 kV (FEG), qui permet l’imagerie des protéines dans leur état natif. Le porte échantillon de ce microscope est ultra-stable pour permettre l’imagerie à haute résolution. Le design « cryo » permet également de maintenir un très faible taux de contamination de l’échantillon dans le microscope (permettant de travailler sur la même grille pendant plusieurs jours).
Le Polara peut être chargé avec 6 échantillons, ce qui permet un criblage rapide pour trouver la meilleure grille. Ce microscope a également un système de chargement des grilles dans le microscope fiable et reproductible (grâce à un environnement protégé dans la baie de chargement, et au système de transfert sous vide).

Pour collecter des données à haute résolution, le microscope est désormais équipé d’une caméra à détection directe d’électrons (K2 Summit GATAN, l’une des caméras les plus performantes actuellement disponible sur le marché), permettant d’atteindre une résolution quasi-atomique, voire atomique dans certains cas. Le Tecnai G2 Polara est également équipé d’un filtre d’énergie GATAN post colonne 2k x 2k.

En plus de l’imagerie haute résolution des échantillons biologiques, le Polara est également capable de faire de la tomographie électronique simple tilt (la collecte d’une série d’images inclinée -70 / +70 degrés) avec :

- Les options suivantes pour l’imagerie :

Caméra K2 Summit Gatan (détection directe d’électrons)

Filtre d’énergie Gatan Tridiem (GIF 2k x 2k)

- Les logiciels suivants :

Tomographie FEI (FEI)
Xplore3D (FEI)
GMS 3.2 (collecte automatique - GATAN)

Le microscope Polara est ouvert aux utilisateurs académiques du PBS, académiques hors PSB et industriels (nationaux et internationaux) après l’approbation de leurs projets scientifiques. Les microscopistes expérimentés ont la priorité, mais d’autres projets peuvent être menés à bien dans le cadre de collaboration.
Dans tous les cas si vous souhaitez utiliser ou avoir accès au microscope Polara ou à d’autres instruments de la plateforme de microscopie électronique, envoyez un courriel à ibs-plateforme-em.contact@ibs.fr

Equipements associés aux microscopes

Evaporateur de carbone

Modèle : Emitech K950X
Application : Permet de déposer un film de carbone homogène à la surface d’une feuille de mica, ou sur une grille formvar.

Glow discharge

Modèle : Emitech K100X
Application : Permet de rendre la surface de la grille hydrophile en chargeant le carbone de la grille négativement ou hydrophobe en chargeant le carbone de la grille positivement.

Automate de congélation

Modèle : FEI Vitrobot MARK IV
Application : Permet de congeler les échantillons pour la cryo-microscopie électronique.

Scanner de micrographies

Modèle : Zeiss/Intergraph Photoscan TD
Application : Permet de scanner des micrographies.

Instruments pour la préparation d’échantillons cellulaires

Automate de cryo-fixation sous haute pression

Modèle : Leica EM-HPM100
Application : Permet de cryo-fixer des échantillons biologiques par congélation sous haute pression (2000 Bars).

Automate de cryo-préparation

Modèle : Leica EM-AFS2 + EM-FSP
Application : Permet de réaliser les étapes de cryo-substitution ou de diminution progressive de température (PLT), notamment de manière automatisée grâce au robot FSP.

(Cryo-)ultra-microtome

Modèle : Leica EM-UC7 + EM-FC7
Application : Permet de réaliser des coupes ultrafines de matériel biologique inclus dans une résine ou en condition cryo.

Automate d’immuno-marquage

Modèle : Leica EM-IGL
Application : Permet de réaliser des immunomarquages ainsi que les étapes de coloration, sur grilles de nickel (particules isolées et coupes en résine ou Tokuyasu).