L’endonucléase III humaine ou hNTH1 est une enzyme contenant un groupe FeS, qui reconnaît et élimine les pyrimidines oxydées de l’ADN. Contrairement à ses homologues bactériens, hNTH1 possède une extension N-terminale de 100 acides aminés impliquée dans son adressage vers le noyau et la mitochondrie et dans la régulation de son activité catalytique par des interactions protéine-protéine. La structure cristalline d’une construction de hNTH1 tronquée en N-terminale a récemment été déterminée, confirmant la flexibilité intrinsèque de l’extension N-terminale et révélant une nouvelle conformation " ouverte " pour la région catalytique.
Dans ce travail, nous avons réalisé une étude biophysique comparative de la hNTH1 complète et d’une hNTH1 tronquée au niveau de l’extrémité N-terminale contenant uniquement le domaine catalytique, similaire à l’EndoIII bactérien. Par des approches de spectroscopie vibrationnelle, de spectroélectrochimie et des expériences de diffusion des rayons X aux petits angles (SAXS), nous avons révélé que ces deux formes d’enzyme possèdent des propriétés distinctes, et que le domaine N-terminal est important pour la liaison à l’ADN au début de la reconnaissance des dommages.
Moe E, Silveira CM, Zuccarello L, Rollo F, Stelter M, De Bonis S, Kulka-Peschke C, Katz S, Hildebrandt P, Zebger I, Timmins J & Todorovic S. Human Endonuclease III/NTH1 : Focusing on the [4Fe-4S] cluster and the N-terminal domain. Chem Comm (2022) 58 p. 12568-12571. DOI : 10.1039/D2CC03643F.