Une nouvelle lumière sur les états noirs des protéines fluorescentes
Les protéines fluorescentes photoconvertibles (PCFPs) sont les marqueurs les plus utilisés en microscopie super-résolution « PALM ». Cependant, en plus de leurs formes verte (native) et rouge (photo-convertie), ces protéines ont une fâcheuse tendance à passer de manière stochastique dans de multiples états noirs non fluorescents, ie à « scintiller ». Les travaux publiés s’intéressent aux états noirs atteints depuis la forme verte des PCFPs et révèlent leur importance pour la microscopie PALM. Le premier article montre que ces états noirs limitent fortement l’efficacité du processus de photoconversion vert-rouge. Le deuxième, en collaboration avec une équipe allemande, montre que les PCFPs peuvent être classées en deux catégories. Les PCFPs de la première catégorie scintillent moins dans leur forme verte, et il est montré que la photo-conversion vert-rouge dite « amorçée » fonctionne. Ce n’est pas le cas pour les PCFPs de la seconde catégorie, qui scintillent plus. Il est montré que ce processus de photoconversion amorcée, récemment découvert par une équipe suisse, permet de réduire de manière substantielle la phototoxicité des expériences.
Photoswitching of Green mEos2 by Intense 561-nm Light Perturbs Efficient Green-to-Red Photoconversion in Localization Microscopy. D. Thédié, R. Berardozzi, V. Adam, D. Bourgeois. J. Phys. Chem. Lett., 2017, 8, 4424−4430 DOI : 10.1021/acs.jpclett.7b01701
A General Mechanism of Photoconversion of Green-to-Red Fluorescent Proteins Based on Blue and Infrared Light Reduces Phototoxicity in Live-Cell Single-Molecule Imaging. B. Turkowyd, A. Balinovic, D. Virant, H. G. Gölz Carnero, F. Caldana, M. Endesfelder, D. Bourgeois, and U. Endesfelder. Angewandte Chemie International Edition England ; 56, 1-7 DOI : 10.1002/anie.201702870