Le laboratoire de spectroscopie optique in crystallo icOS
Contact : Antoine Royant
Le laboratoire icOS Lab (appelé auparavant Cryobench) est une installation dédiée à la réalisation de diverses expériences de spectroscopie optique sur des cristaux de protéine dans des conditions (minidiffractomètre avec caméra de visualisation dans l’axe, changeur d’échantillon, température cryogénique ou ambiante) similaires à celles utilisées lors des collectes de données sur les lignes de cristallographie macromoléculaire de l’ESRF. Les spectroscopies disponibles sont l’absorption de lumière UV-visible, l’émission de fluorescence et le Raman. Des lasers et LED peuvent être utilisées comme sources de lumière actinique pour induire des changements photochimiques dans les échantillons. Ceux-ci sont habituellement des cristaux, mais on peut également étudier des nanolitres des solution. Le laboratoire icOS est souvent utilisé comme installation ’off-line’ (c’est-à-dire que les expériences ne sont pas réalisées en même temps que l’expérience de diffraction correspondante). Il existe également un mode ’on-line’ qui permet l’enregistrement entrelacé de données spectroscopiques et cristallographiques en utilisant soit un microspectrophotomètre d’absorption UV-visible (le ’on-line microspec’) ou Raman (le ’Raman on-line’). Le laboratoire icOS procure ainsi des informations complémentaires qui peuvent être cruciales à l’interprétation correcte de structures cristallines. Les applications de ces techniques incluent l’identification de l’état physiologique de la protéine (par exemple l’état d’oxydation de centres métalliques), le suivi du dégât d’irradiation et la caractérisation d’intermédiaires réactionnels dans des expériences de cristallographie cinétique.
Publications marquantes :
1. Online Raman spectroscopy for structural biology on beamline ID29 of the ESRF. von Stetten D, Giraud, T, Bui S, Steiner RA, Fihman F, de Sanctis D, Royant A. (2017) J. Struct. Biol. 200, 124-127
2. In crystallo optical spectroscopy (icOS) as a complementary tool on the macromolecular crystallography beamlines of the ESRF. von Stetten D, Giraud T, Carpentier P, Sever F, Terrien M, Dobias F, Juers D H, Flot D, Mueller-Dieckmann C, Leonard G A, de Sanctis D, Royant A (2015) Acta Crystallogr. D71, 15-26